一、实验原理
维生素 C 具有很强的还原性.还原型抗坏血酸能还原染料 2,6-二氯酚靛酚 (DCIP),本身则氧化为脱氢型.在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈红色,还原后变为无色.因此,当用此染料滴定含有维生素 C 的酸性溶液时,维生素 C 尚未全部被氧化前,则滴下的染料立即被还原成无色.一旦溶液中的维生素 C 已全部被氧化时,则滴下的染料立即使溶液变成粉红色.所以,当溶液从无色变成粉红色时即表示溶液中的维生素 C 刚刚全部被氧化,此时即为滴定终点,根据滴定用去的2,6-二氯酚靛酚溶液的体积,可以计算出样品中维生素C的含量。
二、仪器和试剂
试剂:
1. 2%草酸
2. 标准抗坏血酸溶液0.1mg/mL
50.0g 抗坏血酸溶于 2%草酸,定容至 500mL,临用前配制。
3. 2,6-二氯酚靛酚溶液
将50mg2,6-二氯酚靛酚溶于 200mL含有 52mg NaHCO3的而热水中,冷却后加水稀释至 250mL,贮于棕色瓶中 4°C冷藏。约可保存一周。每次临用时,用标准抗坏血酸溶液标定。
仪器:
烧杯,玻棒,吸量管,漏斗,漏斗架,蒸发皿,滤纸,容量瓶,滴定管.
三、实验步骤
1.染料标定
取10ml(V0)标准抗坏血酸溶液至蒸发皿中,以2,6—二氯酚靛酚溶液滴定呈粉红色,并在30s内不褪色,即为滴定终点,记下染料的用量(V1)。计算1ml染料相当于抗坏血酸的毫克数,即滴定度(T)。
2.空白滴定
取2%草酸溶液10ml至蒸发皿中,以2,6—二氯酚靛酚溶液滴定呈粉红色,并在30s内不褪色,记下染料的用量(V2)。
3.样品滴定
取制备好的样品滤液10ml至蒸发皿中,用已标定过的2,6—二氯酚靛酚溶液滴定呈粉红色,并在30s内不褪色,记下染料的用量(V3)。
四、实验结果
滴定度(T,mg/ml)=ρ×V0/(V1-V2)
维生素C含量(mg/100g)=(V3-V2)×T/m×(VT/VS)×100
式中:
ρ---标准抗坏血酸的浓度(mg/ml)
V0---染料标定所用的标准抗坏血酸体积,ml;
V1---染料标定所用的2,6—二氯酚靛酚体积,ml;
V2---滴定空白所用染料体积,ml;
V3---滴定样品所用染料体积,ml;
VT---提取样液总体积,ml;
Vs---滴定时吸取样品溶液的体积,ml;
m---样品重量,g。