土壤有效磷测定

1）测定原理 

利用氟化铵-盐酸溶液浸提酸性土壤中有效磷，利用碳酸氢钠溶液浸提中性和石灰性土壤中有效磷，所提取出的磷以钼锑抗比色法测定，计算得出土壤样品中的有效磷含量。 

2）仪器 

万分之一分析天平、往复式振荡器、紫外可见分光光度计 

3）试剂 

1、酸性土壤有效磷（pH＜6.5）测定试剂 

1.1硫酸（ρ=1.84g/mL） 

1.2盐酸（ρ=1.19g/mL） 

1.3硫酸溶液（5%，V/V）：吸取5mL硫酸（A）缓缓加入90mL水中，冷却后用水稀释至100mL。 

1.4酒石酸锑钾溶液（5g/L）：称取酒石酸锑钾0.5g溶于100mL水中。 

1.5硫酸钼锑贮备液：量取126mL浓硫酸，缓慢加入到400mL水中，不断搅拌，冷却。另称取经磨细的钼酸铵10g溶于温度约为60℃ 300mL水中，冷却。然后将硫酸溶液缓慢倒入钼酸铵溶液中，再加入5g/L酒石酸锑钾100mL，冷却后，加水稀释至1L，摇匀，贮于棕色试剂瓶中，此贮备液含10g/L钼酸铵，2.25mol/L H2SO4。 

1.6钼锑抗显色剂 
称取1.5g抗坏血酸（左旋，旋光度+21~22°）溶于100mL硫酸钼锑贮备液中。

1.7二硝基酚指示剂：称取0.2g 2,4-二硝基酚或2,6-二硝基酚溶于100mL水中。 

1.8氨水溶液（1+3）：按氨水、水1:3的体积比配制。 

1.9氟化铵-盐酸浸提剂：称取1.11g氟化铵溶于400mL水中，加入2.1mL盐酸（B），用水稀释至1L，贮存于塑料瓶中。 

1.10硼酸溶液（30g/L）：称取30g硼酸，在60℃左右的热水中溶解，冷却后稀释至1L。 

2、中性、石灰性土壤有效磷（pH≥6.5）测定试剂 

2.1氢氧化钠溶液（ρ=100g/L）：称取10g氢氧化钠溶于100mL水中。 

2.2 0.5mol/L NaHCO3  

浸提液溶解NaHCO3 42.0g于800mL水中，用0.5mol/L NaOH溶液调节浸提液pH至8.5最后定容至1L。此溶液曝于空气可因失去CO2而使pH增高，可与液面加一层矿物油保存之。 

2.3酒石酸锑钾溶液（3g/L）：称取酒石酸锑钾0.3g溶于100mL水中。 

2.4硫酸钼锑贮备液：量取181mL浓硫酸，缓慢加入到800mL水中，不断搅拌，冷却。另称取经磨细的钼酸铵10g溶于温度约为60℃ 300mL水中，冷却。然后将硫酸溶液缓慢倒入钼酸铵溶液中，再加入5g/L酒石酸锑钾100mL，冷却后，加水稀释至2L，摇匀，贮于棕色试剂瓶中。 

2.5钼锑抗显色剂 

称取0.5g抗坏血酸（左旋，旋光度+21~22°）溶于100mL硫酸钼锑贮备液中。

4）测定步骤 

1、酸性土壤有效磷（pH＜6.5）测定 

称取适量通过2mm筛的风干土样于200mL塑料瓶中，加入（25±1℃）盐酸-氟化铵浸提剂，在（25±1℃）下振荡30min（振荡机速率为180±20r/min），取出后立即用无磷滤纸过滤，滤液待测。 

标准曲线的绘制：分别吸取磷标准溶液0mL、1mL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL于50mL容量瓶中，加入氟化铵-盐酸浸提剂，再加入硼酸溶液，摇匀，加水至30mL，再加入二硝基酚指示剂2滴，用硫酸溶液或氨水溶液调节溶液刚显微黄色，加入钼锑抗显色剂5mL，用水定容至刻度，充分摇匀，即得含磷0mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L、1mg/L的磷标准系列溶液。在室温高于20℃条件下静置30min后，用1cm光径比色皿在波长700nm处，以标准溶液的零点调零后进行比色测定，绘制标准曲线。 

吸取试样溶液于50mL容量瓶中，加入硼酸溶液，摇匀，加水至30mL，再加入二硝基酚指示剂2滴，用硫酸溶液和氨水溶液调节溶液刚显微黄色，加入钼锑抗显色剂，用水定容，在室温高于20℃条件下静置30min后，用1cm光径比色皿在波长700nm处，以标准溶液的零点调零后进行比色测定。若测定的磷质量浓度超出标准曲线范围，应用浸提剂将试样溶液稀释后重新进行比色测定。同时进行空白溶液的测定。 

2、中性和石灰性土壤有效磷（pH≥6.5）测定

称取适量通过20目筛子的风干土样于200mL塑料瓶中，加入NaHCO3溶液，塞紧瓶塞，在恒温条件下（25±1℃）振荡机上振荡30min后立即用无磷滤纸过滤，滤液待测。 

绘制标准曲线：分别吸取5 mg/L磷标准溶液0、0.5、1、2、3、4、5mL于25mL容量瓶中，加入碳酸氢钠浸提剂，钼锑抗显色剂，慢慢摇动，排出CO2后加水定容，即得0.0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/L的磷标准系列溶液。在室温高于20℃条件下静置30min后，用1cm光径比色皿在波长880nm处，以标准溶液的零点调零后进行比色测定，绘制标准曲线。 

吸取待测样品溶液于50mL容量瓶或者锥形瓶中，缓慢加入钼锑抗显色剂，慢慢摇动，排出CO2，再加入水，充分摇匀，逐净CO2，在室温高于20℃条件下静置30min后，用1cm光径比色皿在波长880nm处，以标准溶液的零点调零后进行比色测定，若测定的磷质量浓度超出标准曲线范围，应用浸提剂将试样溶液稀释后重新进行比色测定。同时进行空白溶液的测定。 

5）测定结果计算 

土壤有效磷含量（mg/kg）= ρ*V* ts/m/10^3*1000

式中：

ρ——从工作曲线上查得P的质量浓度（µg/mL）； 

V——显色时定容体积（mL）； 

ts——为分取倍数； 

m——风干土质量（g）； 

10^3——将µg换算成mg； 

1000——换算成每kg含P量。