土壤微生物量碳测定

1）测定原理 

土壤经氯仿熏蒸处理，微生物被杀死，细胞破裂后，细胞内容物释放到土壤中，导致土壤中可提取的碳、氨基酸、氮、磷和硫等大幅度增加。通过测定浸提液中的全碳含量可以计算土壤微生物生物量碳，本方法的最大优点在于可应用于淹水土壤的微生物生物量的测定，并且与碳同位素结合，研究土壤和环境的碳循环和转化。 

2）试剂 

所有试剂除注明者外，均为分析纯。 无乙醇氯仿（色谱纯氯仿）、硫酸钾溶液。 

3）仪器 

万分之一分析天平、碳氮分析仪、真空干燥箱、摇床 

4）测定步骤 

1.称取适量新鲜土壤放入100mL烧杯中，放入干燥器中，干燥器底部放置几张用水湿润的滤纸，同时放入一个装有50mL NaOH溶液和一个装有约50mL无乙醇氯仿的小烧杯（同时加入少量抗暴沸的物质），用少量凡士林密封干燥器，用真空泵抽气至氯仿沸腾并保持至少2min。关闭干燥器漏阀门，在25℃的黑暗条件下放置24h。打开阀门，如果没有空气流动的声音，表示干燥器漏气，应重新称样进行熏蒸处理。当干燥器不漏气时，取出装有水和氯仿的玻璃瓶，氯仿倒回瓶中可重复使用。擦净干燥器底部，用真空泵反复抽气，直到土壤闻不到氯仿气味为止。同时称同样量的土壤1份，不进行熏蒸处理，放入另一个真空干燥器中，作为对照。 

2.微生物量碳浸提 

熏蒸结束后，将土壤全部转移到250mL三角瓶中，加入硫酸钾溶液，在振荡机上浸提30min过滤。对照处理，同上用硫酸钾溶液浸提，浸提液立即测定或在-15℃保存。 

3.微生物量碳测定 

浸提液直接用碳氮分析仪测定碳含量。 

5）测定结果计算 

微生物生物量碳（Bc）的计算 

ω（C）=Ec×2.2 

式中： 

ω（C）——微生物生物量碳的质量分数，mg/kg；   

Ec——熏蒸土样有机碳量与未熏蒸土样有机碳量之差，mg/kg； 

2.2——校正系数。