1)测定原理
纤维素是由葡萄糖基组成的多糖,在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖。然后在浓硫酸作用下,使单糖脱水生成糠醛类化合物。利用蒽酮试剂与糠醛类化合物的蓝绿色反应即可进行比色测定。
2)仪器
万分之一分析天平、分光光度计
3)试剂
60%H2SO4溶液、浓H2SO4 、2%蒽酮试剂:2g蒽酮溶解于100mL乙酸乙酯中,贮置于棕色试剂瓶中。
4)测定步骤
1、准确称取风干样品100mg,放入25mL量瓶中,将量瓶放入冰浴中,加冷的60%H2SO4,在冷的条件下消化处理半小时,然后用60%H2SO4稀释至刻度,摇匀。吸取上述初提取液,放入25mL容量瓶中,将容量瓶置于冰浴中,加蒸馏水释至刻度,摇匀,过滤,滤液备用。
2、吸取上液2.0mL,加入 2%蒽酮试剂,再沿管壁加入浓H2SO4,盖上塞子,摇匀静置12min,冷却测定样品在620nm波长下的吸光值。
5) 测定结果计算
X(mg/g)= A*D/m*10^-3
式中:
A—在标准曲线上查得的比色管中纤维素含量值,μg;
D—分取倍数(提取mL×稀释倍数/测定取液量mL);
10^-3—将μg换算成mg的系数;
m—样品称重量,g。